客服电话：13636671697
service@designgene.com.cn
VSVG
| VSVG（水泡性口炎病毒糖蛋白）包膜具有广泛的宿主范围，能够感染几乎所有的哺乳动物细胞。这使得VSVG包膜在逆转录病毒载体的应用中非常受欢迎，因为它可以确保病毒载体能够高效地感染目标细胞。VSVG包膜还通过其融合活性促进了病毒与宿主细胞的结合和进入，从而提高了病毒载体的感染效率 一、VSVG包膜蛋白的特性 VSVG，即水泡性口炎病毒（Vesicular stomatitis virus，VSV）的糖蛋白，是VSV病毒颗粒表面的一种重要蛋白。它负责介导病毒与宿主细胞膜的融合，从而使病毒基因组能够进入宿主细胞进行复制。VSVG蛋白具有广泛的宿主细胞嗜性，这意味着它可以与多种宿主细胞的细胞膜受体结合，从而扩大逆转录病毒载体的宿主范围。 二、逆转录病毒包装原理 逆转录病毒包装是指将重组逆转录病毒载体与包装质粒共同转染到包装细胞中，利用包装细胞提供的病毒复制所需的反式作用因子（如Gag、Pol等蛋白）和顺式作用元件（如包装信号等），在细胞内组装成具有感染能力的病毒颗粒。这些病毒颗粒随后被释放到培养基中，用于感染目标宿主细胞。 三、VSVG包膜在逆转录病毒包装中的应用 1.扩大宿主范围：由于VSVG蛋白具有广泛的宿主细胞嗜性，因此使用VSVG包膜的逆转录病毒载体可以感染多种宿主细胞，包括那些原本对逆转录病毒不敏感的细胞类型。 提高感染效率：VSVG蛋白能够高效地介导病毒与宿主细胞膜的融合，从而提高病毒感染宿主细胞的效率。 2.制备假型病毒：通过将VSVG蛋白与重组逆转录病毒载体结合，可以制备出假型病毒颗粒。这些假型病毒颗粒保留了逆转录病毒载体的基因传递能力，但具有VSVG蛋白的宿主细胞嗜性。这对于研究病毒入侵机制、筛选抗病毒药物以及开发疫苗等方面具有重要意义。 四、VSVG包膜逆转录病毒包装的步骤 1.构建重组逆转录病毒载体：将目的基因插入到逆转录病毒载体的基因组中，构建成重组逆转录病毒载体。 2.准备包装质粒：包装质粒提供了病毒复制所需的反式作用因子。这些质粒通常包含Gag、Pol等蛋白的编码基因以及包装信号等顺式作用元件。 共转染包装细胞：将重组逆转录病毒载体和包装质粒共同转染到包装细胞中。转染方法可以采用磷酸钙共沉淀法、脂质体介导法或电穿孔法等。 收集病毒颗粒：在转染后的一定时间内（如48-72小时），收集包装细胞的培养基。其中含有释放到培养基中的病毒颗粒。 3.纯化病毒颗粒：通过超速离心、密度梯度离心等方法对病毒颗粒进行纯化，以提高病毒滴度和去除杂质。 4.感染目标宿主细胞：将纯化后的病毒颗粒用于感染目标宿主细胞，实现目的基因的传递和表达。 |
试用装免费申请
