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Cre/Flp
Cre依赖——Cre-LoxP系统
Cre（Cyclization Recombination Enzyme）是一种由大肠杆菌噬菌体P1编码的蛋白质，包含343个氨基酸，分子量约为38 kDa。Cre不仅具有催化功能，还能特异性识别loxP位点，与限制酶作用类似。loxP（locus of X-over P1）位点长34 bp，包括两个13 bp的反向重复序列和一个8 bp的间隔区。反向重复序列是Cre重组酶的特异性识别区域，间隔区则决定loxP位点的方向。
（1）Cre-LoxP系统的基因重组方式
Cre-LoxP系统是一种位点特异性的基因重组技术，广泛应用于基因敲除、基因插入、基因翻转和基因易位。Cre重组酶可识别loxP位点并在其间诱导基因重组，重组结果取决于两个loxP位点的方向。主要方式包括：
若两个loxP位点位于同一DNA链上且方向相同，Cre重组酶会删除两者间的序列；
若两个loxP位点位于同一DNA链上但方向相反，Cre重组酶会翻转两者间的序列；
若两个loxP位点位于不同的DNA链或染色体上，Cre重组酶可促使两条DNA链发生交换或染色体易位；
若在两条DNA链或染色体上分别有四个loxP位点，Cre重组酶可诱导位点间序列互换。
（2）Cre-LoxP系统的优势
时空特异性：通过特定启动子或调控基因实现；
高效性：不受靶基因大小或位置限制；
准确性：动物模型中未见非特异重组；
快速性：能在受精卵分裂前完成。
Flp依赖——Flp-FRT系统
FLP（flippase）也是一种位点特异性的DNA重组酶，克隆自酿酒酵母，含423个氨基酸。Flp重组酶作用于包含48 bp反向重复序列的FRT位点，一些突变FRT（如F3）也能被识别，但仅能与相同序列发生重组。
Cre（Cyclization Recombination Enzyme）是一种由大肠杆菌噬菌体P1编码的蛋白质，包含343个氨基酸，分子量约为38 kDa。Cre不仅具有催化功能，还能特异性识别loxP位点，与限制酶作用类似。loxP（locus of X-over P1）位点长34 bp，包括两个13 bp的反向重复序列和一个8 bp的间隔区。反向重复序列是Cre重组酶的特异性识别区域，间隔区则决定loxP位点的方向。
（1）Cre-LoxP系统的基因重组方式
Cre-LoxP系统是一种位点特异性的基因重组技术，广泛应用于基因敲除、基因插入、基因翻转和基因易位。Cre重组酶可识别loxP位点并在其间诱导基因重组，重组结果取决于两个loxP位点的方向。主要方式包括：
若两个loxP位点位于同一DNA链上且方向相同，Cre重组酶会删除两者间的序列；
若两个loxP位点位于同一DNA链上但方向相反，Cre重组酶会翻转两者间的序列；
若两个loxP位点位于不同的DNA链或染色体上，Cre重组酶可促使两条DNA链发生交换或染色体易位；
若在两条DNA链或染色体上分别有四个loxP位点，Cre重组酶可诱导位点间序列互换。
（2）Cre-LoxP系统的优势
时空特异性：通过特定启动子或调控基因实现；
高效性：不受靶基因大小或位置限制；
准确性：动物模型中未见非特异重组；
快速性：能在受精卵分裂前完成。
Flp依赖——Flp-FRT系统
FLP（flippase）也是一种位点特异性的DNA重组酶，克隆自酿酒酵母，含423个氨基酸。Flp重组酶作用于包含48 bp反向重复序列的FRT位点，一些突变FRT（如F3）也能被识别，但仅能与相同序列发生重组。
| Flp | rAAV-mDlx-NLS-Flpo |
| Flp | rAAV-CMV-SV40 NLS-Flp |
| Flp | scAAV-CMV-DIO-Flp |
| Flp | scAAV-hSyn-SV40 NLS-Flp |
| Flpo | rAAV-EF1α-DIO-mWGA-Flpo |
| Flp | rAAV-EF1α-DIO-Flp-P2A-mCherry |
| Flp | rAAV-CAG-FLEX-Flp |
| Flp | rAAV-hSyn-SV40 NLS-Flp |
| Flp | rAAV-hSyn-Flp |
| Flp | rAAV-hSyn-SV40 NLS-Flp |
| Flp | rAAV-hSyn-Flp-EGFP |
| Flp | rAAV-CAG-DIO-WGA-Flp |
| Flp | rAAV-EF1α-DIO-Flp |
| Flp | rAAV-EF1α-DIO-Flp-T2A-EGFP |
| Flp | rAAV-fSST-SV40 NLS-Flp-bGH polyA |
| Flp | rAAV-fPV-SV40 NLS-Flp-bGH polyA |
| Flp | rAAV-mDlx-NLS-Flpo |
| Flp | rAAV-CaMKIIα-SV40 NLS-Flp |
| Flp | scAAV-CMV-DIO-Flp |
| Flp | rAAV-hSyn-DIO-Synaptophysin-pHoran4-P2A-Flp |
| Flp | rAAV-hSyn-SV40 NLS-Flp-P2A-mCherry |
| Flpo | rAAV-EF1α-DIO-mWGA-Flpo |
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