miRNA
microRNA(miRNA)是真核生物体内一类内源性的、长度约为17~25个碱基对的小非编码RNA。自1993年miRNA被首次发现以来,小RNA领域所取得的进展和发现彻底颠覆了科学界对基因调控的传统认知。从胚胎发育的初始阶段,到细胞凋亡的终结过程,乃至肿瘤的生长与发展,miRNA都在这一系列生理和病理过程中扮演着至关重要的角色。与遗传、代谢、传染病以及肿瘤相关的各种miRNA,为科学家们进行病理研究开辟了新的视角,并有望成为可靠的疾病生物标志物。目前,科学家们正积极地通过调控miRNA的功能、研发创新的体内递送技术,探索对疾病的干预治疗方法。值得一提的是,miRNA近来还被发现能够介导跨物种的进化与适应,这一领域的深入探索无疑将揭示更多关于miRNA的奥秘。
1.miRNA mimic
miRNA mimic是一种化学合成的RNA分子,能够模拟生物体内源的miRNA。它通过化学合成的方法,增强内源性miRNA的功能,是研究miRNA功能的重要工具。
增强功能:miRNA mimic能够模拟内源性miRNA的高水平表达,从而增强其对靶基因的调控作用。
高效转染:无需构建载体,只需用转染试剂包裹即可转染进入细胞,操作简便,转染效率高。
广泛应用:适用于短期(<1周)的miRNA功能获得性细胞研究,是miRNA功能研究的一大利器。
2.miRNA inhibitor
miRNA inhibitor是一种化学修饰的RNA分子,专门针对细胞中特异的靶miRNA进行抑制。它通过化学合成的方法,削弱内源性miRNA的基因沉默效应,是研究miRNA功能缺失的重要工具。
靶向抑制:miRNA inhibitor能够特异地靶向和敲除单个的miRNA分子,削弱其对靶基因的调控作用。
高效特异:易于获得,操作简便,实验周期短,具有高效特异的抑制效果。
功能研究:适用于miRNA功能缺失性研究,如筛选miRNA靶位点、筛选调控某一基因表达的miRNA等。
3.miRNA agomir
miRNA agomir是一种经过特殊化学修饰的双链miRNA mimic,具有更高的稳定性和转染效率。它用于模拟过表达特定miRNA的情况,是研究miRNA功能的有力工具。
高稳定性:经过特殊化学修饰,如反义链修饰、3’端胆固醇修饰等,使miRNA agomir在细胞内更加稳定。
高效转染:无需转染试剂,直接溶解后即可用于动物实验,大大提高了实验效率。
广泛应用:适用于动物体内外实验,特别是长期(数周至数月)的miRNA功能研究。
4.miRNA antagomir
miRNA antagomir是一种经过特殊化学修饰的单链miRNA抑制剂,通过与体内的成熟miRNA强竞争性结合,阻止miRNA与其靶基因mRNA的互补配对,从而抑制miRNA发挥作用。
强竞争性结合:miRNA antagomir与成熟miRNA具有高度的序列互补性,能够强竞争性结合,有效抑制miRNA的功能。
高稳定性和抑制效果:经过特殊化学修饰,如3’端胆固醇修饰、全链甲氧基修饰等,使miRNA antagomir在动物体内外具有更高的稳定性和抑制效果。
灵活给药:在动物实验中,miRNA antagomir可通过全身或局部注射、吸入、喂药等方法进行给药,作用效果持续时间可长达数周。