修饰标记 siRNA
修饰标记 siRNA
siRNA进行多种标记物的标记,包括FAM、Cy3、Cy5、胆固醇(cholesterol)、Biotin。相对于未标记的siRNA具有转染情况可视的优点,通过流式细胞仪、荧光显微镜、激光共聚焦显微镜等可以观察到荧光标记的siRNA,方便优化转染条件、siRNA胞内定位等,同时可根据对转染过程的全程追踪来分析转染和蛋白表达的关系。研究表明,反义链5’端标记会影响干扰效果,其他三个末端修饰后对沉默活性几乎没影响,目前公认最好的是将荧光修饰标记在正义链的5’端位点。5’-荧光标记的siRNA有助于直接观察转染效率。本公司提供的5’-荧光标记的siRNA通常用FAM进行标记。
siRNA进行多种标记物的标记,包括FAM、Cy3、Cy5、胆固醇(cholesterol)、Biotin。相对于未标记的siRNA具有转染情况可视的优点,通过流式细胞仪、荧光显微镜、激光共聚焦显微镜等可以观察到荧光标记的siRNA,方便优化转染条件、siRNA胞内定位等,同时可根据对转染过程的全程追踪来分析转染和蛋白表达的关系。研究表明,反义链5’端标记会影响干扰效果,其他三个末端修饰后对沉默活性几乎没影响,目前公认最好的是将荧光修饰标记在正义链的5’端位点。5’-荧光标记的siRNA有助于直接观察转染效率。本公司提供的5’-荧光标记的siRNA通常用FAM进行标记。
碱基修饰 |
2’-Ome rU | 增强抗核酸酶活性的能力,提高siRNA稳定性 |
2’-Ome rC | ||
2’-Ome rG | ||
2’-Ome rA | ||
末端修饰 |
5’-cholestrol | 促进细胞对siRNA的吸收,增加透膜效果,延长siRNA在血清中的半衰期 |
5’-Biotin | 用于RNAi机理和生物学研究 | |
5’-氨基 | ||
5’-FAM(绿色荧光) | 优化各种细胞的转染条件,跟踪细胞或动物体内siRNA的吸收及分配 |
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5’-Cy3(红色荧光) | ||
5’-Cy5(红色荧光) | ||
5’-Phosphate-on | 增强抗核酸酶活性的能力,提高siRNA稳定性 | |
3’-Phosphate-on |