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自噬

 

       自噬是细胞内一种独特的“自我消化(Self-eating)”现象,尽管这两者在某种程度上共享某些刺激因素和调节蛋白,但它们发生的阈值和条件却存在显著差异。目前,关于自噬与凋亡之间如何转换和协调的具体机制,科学界尚未完全明晰。
自噬过程涉及细胞膜(其确切来源尚存争议,但多数观察显示其为双层膜结构,有时也呈现多层或单层形态)包裹部分胞质以及细胞内待降解的细胞器和蛋白质,形成自噬体。这些自噬体随后与溶酶体融合,形成自噬溶酶体,从而降解其内部包裹的物质,这一过程对于维持细胞稳态和实现细胞器的更新至关重要。
      
为了深入观察和检测自噬过程,当前文献中常用的策略与手段包括:利用Western blot技术检测LC3蛋白的剪切情况;通过电子显微镜直接观测自噬体的形态与形成过程;以及在荧光显微镜下,采用GFP(或RFP)-LC3等融合蛋白作为标记,实时追踪自噬体的形成及其后续的降解动态。
近年来,随着对自噬流研究的不断深入,典君生物凭借自主创新能力,成功研发出用于实时监测自噬(流)的mCherry-GFP-LC3腺病毒工具。该工具利用mCherry标记并追踪LC3蛋白,同时,由于GFP荧光蛋白对酸性环境敏感,当自噬体与溶酶体融合形成自噬溶酶体后,GFP荧光会发生淬灭,此时仅能检测到mCherry的红色荧光。这一特性使得我们能够清晰地观察到自噬流从形成到降解的完整过程,为自噬研究提供了更为直观且有力的手段。
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