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ItraqTMT标记定量
技术简介
iTRAQ（Isobaric tags for relative and absolute quantification）是由美国ABI研发的一种体外同种同位素标记的相对与绝对定量技术。TMT（Tandem mass tags）则是由Thermo研发的多肽体外标记技术。两种技术都是采用4种或8种同位素编码的标签，通过特异性标记蛋白多肽N末端或赖氨酸侧链基团，而后进行串联质谱分析，可同时比较2~8种不同样品中蛋白质的相对含量或绝对含量。iTRAQ和TMT的原理都是等重标签标记，化学反应原理和用来定量的原理都是一致的，只是化学结构略有不同。同位素试剂标记多肽氨基基团后，等量混匀多肽并进行LC-MS/MS分析。一级质谱中，不同样品来源的同一肽段表现出相同的m/Z；二级质谱中，化学键断裂释放出报告离子，低质量区的报告离子强度反映了该肽段在不同样品中的相对表达量，高质量区的肽段碎片离子m/Z反映了该肽段的序列信息。质谱原始数据经过数据库检索，即可得到样本中所含蛋白及其表达差异。技术流程
仪器设备
•Thermo Scientific Q Exactive HF-X•Thermo Scientific Orbitrap Fusion Lumos
•Thermo Scientific Q Exactive
技术优势
1/高通量：8-plex iTRAQ试剂盒和16-plex TMT试剂盒可同时标记最多8组或16组样本；2/适用范围广：几乎可对任何物种的各类蛋白质进行分离鉴定，不受蛋白大小或酸碱性等因素影响；
3/灵敏度高：低丰度蛋白也能检出；
4/定量准确：不同标记的肽段等量混合后上机，避免技术误差，提高检测效率。
应用范围
►基础医学：疾病标志物，疾病标志物筛选，发病机制，疾病分型等；物种蛋白质草图构建。►生物医药：药物机理，药效评价，药物开发，药物作用靶点研究，标志物，发病机制，疾病分型等；
►农林畜渔：抗逆胁迫，生长发育，耐药，植物胁迫，抗逆研究和致病机理等。
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